父母代蛋种鸡场鸡白痢净化和维持的关键措施
白痢是由白痢沙门氏菌引起的一种急性化脓性传染病。主要危害鸡。以白痢、乏力和败血症为特征，常导致大量死亡。感染的成年鸡多为慢性或无症状，但带菌者可通过生殖道垂直传播至下一代或污染卵，导致种蛋孵化率下降。目前，我国部分蛋鸡白痢沙门氏菌阳性率较高。蛋鸡沙门氏菌纯化存在的主要问题是：缺乏快速准确的病原和抗体检测技术；种鸡的不完全纯化导致商品蛋鸡感染的世代扩增；饲料、饮用水和饲养环境中的沙门氏菌污染。鸡白痢沙门氏菌在我国养殖业中的纯化已进行了几十年。但由于工作的连续性和严密性不足，国家尚未制定相应的净化标准。到目前为止，还没有一家育种公司（除了那些从国外纯化公司完全引进祖先或父母的育种公司）宣称其已达到完全纯化的标准。同时，卫平课题组还发现，该病原体一直在种鸡体内循环。因此，人民针对这些产业化问题，国家蛋鸡产业技术体系开展了蛋鸡沙门氏菌净化技术的研究与示范，并将6项工作列为国家蛋鸡产业技术体系的重点任务，包括蛋鸡和蛋制品沙门氏菌抗原和抗体快速检测平台技术、种鸡沙门氏菌检疫纯化控制技术等，研制了沙门氏菌快速检测试剂盒。利用建立的沙门氏菌病原体和抗体快速检测平台，对种鸡和商品蛋鸡进行全面检疫。第消除沙门氏菌阳性鸡和种鸡蛋。经2～4次检疫和纯化，培养出无鸡白痢和肠炎沙门氏菌感染的鸡（
1白痢沙门氏菌
检测方法定期检疫是控制和纯化鸡白痢的最有效措施，消灭感染鸡群，结合生物安全措施。从样品中分离鉴定白痢沙门氏菌是诊断白痢的可靠方法。此外，血清学和分子生物学方法也被广泛应用（
1.1血清学方法
血清学试验是判断鸡的感染和疫情的常规方法。wholePat、AgPt和PHA在我国应用广泛。OIE认为脂多糖（LPS）作为包衣抗原是检测鸡白痢和伤寒沙门氏菌感染最特异的方法（
姜伟伟认为Pat的效率高于SAT，但检出率低于SAT，还要考虑技术人员的技术水平、鸡的生理、设备的质量、队员之间的配合等因素，选择合适的检测技术（
曹春梅等建立了斑点金免疫渗滤法（DIGFA）快速检测伤寒和白痢抗体多倍体金标LPS抗原。与pat相比，DIGFA具有灵敏度高、抗体检测早、抗体效价高、准确性高等优点。用辣根过氧化物酶标记单克隆抗体3-47-0和包衣白痢沙门氏菌脂多糖抗原，建立了白痢沙门氏菌和伤寒沙门氏菌的抗体阻断ELISA检测方法。该方法识别能力强。在人工感染试验中，从第2周开始，该方法能检测出所有鸡的特异性抗体，比全血平板凝集试验（PAT）早1周，具有较高的特异性和敏感性。此外，该方法还可以检测出S阿尔莫氏菌感染与白痢和伤寒沙门氏菌有共同抗原（
1.2分子生物学方法
分子生物学诊断技术以其较高的特异性和敏感性，在白痢沙门氏菌的诊断中得到越来越多的应用。耿世忠等根据鸡白痢沙门菌和伤寒沙门菌Pa5基因在237和598碱基上的差异，设计合成了等位基因特异性PCR引物，建立了鸡白痢沙门菌快速检测的PCR方法。PCR方法能特异性鉴定鸡白痢沙门菌。检测灵敏度为100pgdna，与常规检测方法的符合率为94.3%。薛俊龙等建立了基于鸡白痢沙门菌/TiC基因序列的特异性PCR诊断方法，可检测到50pg以上的细菌DNA，其阳性检出率和灵敏度均高于常规检测方法。李秋春[141]从鸡白痢沙门氏菌中克隆了840bp的ipaj基因序列，获得了体外表达的37ku融合蛋白，可与鸡白痢沙门氏菌阳性血清反应。对105株鸡白痢沙门菌进行PCR检测，结果表明，所有菌株均能扩增出ipaj基因。Ipaj基因广泛存在于白痢沙门氏菌菌株中，具有免疫原性（同时，近两年来，王洪宁的研究小组建立了多个x-PCR法检测肠炎沙门氏菌、白痢沙门氏菌和伤寒沙门氏菌，lamp法快速检测沙门氏菌，特异性免疫磁珠多重PCR法快速检测沙门氏菌。多重PCR检测技术的重点是优化用于扩增的extag酶，降低了PCR的检测限，提高了反应的灵敏度，具有比其他标记酶更高的稳定性。该方法的建立可缩短样品检测时间（8～16h），重复性强（4次重复率99%），准确度高。沙门氏菌的lamp快速检测方法是在系统中加入优化的钙黄绿素MnCl:溶液作为指示剂，然后在系统中加入矿石反应。反应后，可根据颜色变化用肉眼判断结果，避免了反应后瓶盖开度测定引起的假阳性干扰（
沙门氏菌特异性免疫磁珠：采用多重PCR扩增、克隆和表达沙门氏菌外膜蛋白基因OmpC。以纯化蛋白为抗原免疫新西兰兔。制备沙门氏菌特异性抗体，用磁珠载体包被，构建沙门氏菌特异性免疫磁珠。将免疫磁珠与多重PCR相结合，检测方法的敏感性和特异性，建立快速检测方法。敏感性该方法比普通PCR方法的灵敏度高10倍，免疫磁珠能富集样品中的沙门氏菌，可代替繁琐的沙门氏菌富集过程，节省42-48小时的检测时间（
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