新城疫是由新城疫病毒引起的鸡和火鸡的一种急性、高传染性和毁灭性传染病。新城疫（NDV）流行于世界各地，已在150多个国家和地区发生。随着我国养鸡业高度集约化的发展，新城疫的防治也备受关注。近年来，新城疫的流行趋势发生了变化。非典型新城疫具有发病率低、临床症状不典型、病理改变不典型、死亡率低、产蛋量低等特点，使新城疫的防治工作更加复杂和困难。新城疫（NDV）仍然是第三大传染病之一e严重危害我国养禽业，造成巨大经济损失的重大疾病。除了造成大量死亡的直接损失外，幸存者的生长发育、饲料转化率低、产蛋量下降、受精率和孵化率下降等造成的间接经济损失，而封锁隔离措施所耗费的大量人力财力（

由于机体免疫功能等诸多因素的综合影响，新城疫疫苗接种效果不佳，甚至出现免疫功能衰竭，新城疫的发病率仍然很高。而且，由于鸡的快速发展养鸡业近十年来，养鸡场数量急剧增加，并在全球范围内蔓延，使得疾病类型更加复杂，病情严重。为了更有效地控制新城疫，疫苗接种后新城疫抗体效价监测常被作为评价免疫效果的重要依据。鸡血清中新城疫抗体的检测方法有单向放射免疫扩散试验、单向放射溶血试验、琼脂扩散试验、鸡胚中和试验、菌斑中和试验、酶联免疫吸附试验和血凝抑制试验等，而血凝抑制试验是检测鸡血清新城疫抗体的有效方法新城疫抗体的定量测定常采用n试验（HA）和血凝抑制试验（HI）。ELISA可半自动操作，其技术已得到推广，与hi有良好的相关性。到目前为止，鸡红细胞血凝抑制试验仍是一种快速、准确的检测方法

。在本次监测中，采用hi法对某市免疫的鸡新城疫疫苗家系1000只100日龄鸡进行了检测。结合农户描述和现场调查，对新城疫疫苗的免疫效果进行评价，以期在鸡场预防和控制新城疫（

材料和方法

材料从100日龄和150日龄鸡新城疫疫苗免疫的1000只鸡中随机抽取

试剂和药物，鸡新城疫HA抗原，鸡新城疫阳性血清和阴性血清；氯化钠、磷酸二氢钾、氢氧化钠、柠檬酸三钠、葡萄糖、柠檬酸（

仪器微振子、微量取样器、离心机、天平、便携式压力蒸汽灭菌器、90ov 96孔凝血板、，冰箱（

（pH7.0~7.2）磷酸盐缓冲盐水：

氯化钠（gb1266-77）170g

磷酸二氢钾（gb1274-77）13.6g

氢氧化钠（gb-77）3.0g

蒸馏水蒸馏水1000ml

，4℃储存℃, 用于20倍稀释

溶液配置（

葡萄糖2.05克

柠檬酸钠0.8克

柠檬酸0.055克

0.42氯化钠

加蒸馏水至1000ml，加热溶解后调6.1至6.1，高压灭菌，储存在4度

法

鸡新城疫红细胞凝集试验，参考文献，用微量法（制备

1%鸡红细胞悬液）测定鸡新城疫抗原HA值：将3只无禽流感和新城疫抗体的成年健康公鸡与等量的艾氏剂混合s液，用1倍稀释液洗涤3次，每次1000r/min离心10min，洗涤后用1倍稀释液制备1%（V/V）红细胞悬液。4℃ 贮存（

ha试验：从左至右，96孔v-凝固板每孔加25倍稀释液μ 五十、 绘制25μ 将L抗原加入第一孔中，与微量取样器充分混合，然后去除25 mlμ 50.加入第二孔，按此方法从左至右稀释至第11孔，吸取第11孔25%的水μ L丢弃，2孔加入1stNo抗原作为阴性对照；每个孔再加25个μ L稀释剂；每孔加入25%红细胞悬液μ 50.血液公司结果表明，以100%凝集的最大稀释井为新城疫抗原（HA）值，即一个凝集单位。文献报道12孔

鸡新城疫血凝抑制（HI）试验未见凝集现象，用微量法（

测定血清中新城疫血凝抑制抗体的效价：根据测定的新城疫抗原的血凝值，计算四种血凝单位抗原的稀释倍数（血凝值/4），制备四种血凝单位抗原用一倍稀释液稀释单位抗原，放入冷藏室备用（

待检血清制备：取32只待检鸡血液5ml，置于试管内。血液凝集后，以3000r/min离心2min，吸取待测血清（

HI试验：在96孔V型血凝板上，25μ 从第一孔至第11孔加入l稀释液，第11孔和第12孔分别为抗原和红细胞对照；拿25块μ 取l份待测血清滴入第一孔，用微量采样器混合均匀，取25份μ 我把它加到第二口井里。按此方法，从左至右稀释至第十孔，取25μ L和dis打牌，加50μ l稀释液注入第十二口井；除了12口井，25口μ 在每个孔中加入1/4单位抗原，并在室温（20℃）下培养℃) 30分钟；25μ 每孔加入1%红细胞悬液l；摇动2分钟后，在室温（20℃）下孵育℃) 结果：100%抗凝集血清的最大稀释度为血清的效价，即血凝抑制（HI）值。11孔抗原100%凝集，12孔红细胞100%不凝集（新城疫a结果表明，新城疫抗原

的血凝值为1∶ 4个凝集单位的稀释率为1∶ 血清中128

新城疫抗体新城疫抗体的血凝抑制率

抗原对照组为100%，红细胞对照组为100%；4只为log2，14只为3log2，12只为5log2，4只为6log2，4只为7log2，4只为8log2（

，根据以上结果，37.5%的鸡接种了高值新城疫疫苗≥ 6log2，高值免疫率为62.5%≤ 5log2，高值免疫25%≤ 4 log2，表明鸡未能免疫和应该重新免疫。所有鸡的hi值均小于8log2，临床健康。hi值的分布是离散的，因此可以判断没有新城疫病毒感染。根据我们的建议，该家用鸡新城疫油乳剂灭活疫苗对鸡进行了再免疫。免疫50d后，抗体监测结果大于5log2，小于8log2，说明本次监测鸡只合格，对新城疫病毒有一定的抗性（

讨论

免疫效果评价

，62.5%的鸡接种新城疫疫苗，

hi值低于5log2，25%其中小于等于3 log2。雏鸡受到新城疫病毒感染的威胁，有37.5%的雏鸡感染率大于或等于6log2，说明雏鸡未能免疫，应重新免疫。鸡的hi值小于或等于8log2，hi值的分布是离散的，因此可以判断没有新城疫病毒感染。根据建议，该家系鸡再次接种新城疫抗体合格（

免疫失败因素

疫苗效价不高。农民贪图便宜或方便，从个别药店购买一些低滴度的疫苗进行鸡免疫如果免疫方法不当，农民担心疫苗效果不好，他们选择喝3-4倍剂量的疫苗，使一些鸡能喝到比正常剂量多6-7倍的疫苗，极易引起免疫麻痹或超过机体免疫耐受，使鸡患病；同时，有些鸡只喝少量疫苗，免疫力很差（不合理应用

疫苗），认为灭活疫苗诱导的抗体水平高，持续时间长。因此，选择新城疫灭活疫苗进行肌肉注射对第一次免疫，忽视了减毒疫苗的免疫效果，导致免疫效果差。还有一些农民为了省事方便，在不注射疫苗的情况下，采用饮水的方法进行免疫接种。我们之前监测的一个家庭是，60日龄的鸡没有肌肉注射新城疫Ⅰ号疫苗，而是在饮用水中注射新城疫Ⅰ号疫苗，导致免疫不合格（近年来，农村地区的农民越来越意识到免疫的重要性。但有时抗体滴度在体内仍很高，均匀性很好弱毒疫苗盲目免疫易引起抗体水平下降，抗体下降时易感染新城疫病毒。另一方面，由于抗原的频繁刺激，机体产生疲劳反应，形成免疫抑制（

免疫间隔时间较长。由于母源抗体的影响和免疫器官发育不完全，鸡首次免疫后抗体效价往往不高，且下降较快。因此，使用减毒疫苗应在第一次免疫后3周内进行两次免疫，且时间间隔过长，容易造成免疫失败还有感染。养鸡场由于鸡体条件差，往往想把病治好再去免疫，人为拖延免疫时间，造成鸡体健康状况差，抵抗力下降（

免疫系统的缺陷影响鸡的营养状况。农村鸡的饲料多为自配，随机性较大。由于营养不良（

各种应激因素的影响，容易引起某些营养素的缺乏或不足，如一些必需氨基酸、维生素和微量元素等，导致免疫系统功能的抑制。例如，温度和湿度的快速变化，人口膨胀，换料，饥饿口渴会导致免疫系统功能的暂时抑制。此时，接种疫苗容易引起免疫功能衰竭（

干扰免疫抑制性疾病。如传染性法氏囊病、传染性支气管疾病、马立克氏病等可降低免疫应答的疾病（

缺乏综合防治措施。为了降低养鸡成本，农村大多采用温室养殖，鸡舍简陋，保温通风能力差，环境恶劣，导致鸡群抵抗力下降。一旦防疫消毒措施不力，很容易引起新的问题城市病的发生与流行。农民虽然按照免疫程序和要求进行免疫，却忽视了病鸡的隔离消毒等防疫措施。病鸡被随意丢弃，甚至在市场上出售，以减少一些损失，导致疾病在更大范围内传播（

防控措施：隔离、消毒和严格防止病毒传入。紧急疫苗预防。新城疫多价油苗+IV株疫苗组，各1ml，用于紧急预防（

佐剂预防。添加黄芪多糖和电解多糖，提高其抗氧化能力新城疫疫苗的免疫保护（End）

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