
奶牛的卵移植
“卵子移植”是胚胎或受精卵移植的缩写。其特点是从优秀奶牛(供体)中取出受精卵,冷冻保存并运输,然后移植到其他奶牛(受体)的子宫角或输卵管中,使其发育并分娩。小牛的特征与供体牛相似。因此,对于充分发挥优良奶牛的繁殖潜力,促进优良雌配子的利用,加速家畜的改良等具有极其重要的实用价值。,在动物遗传学和生殖生理学的研究中起着重要的作用胚胎收集、胚胎保存和胚胎移植
又称超排。是指用激素治疗供体奶牛使其发情,并能排出大量成熟卵子。经过合理的人工授精,可获得稳定数量的可移植胚胎(
处理方法:奶牛发情后913天开始肌注FSH,每次50iu,每日2次,间隔12小时,连续4天,共8次。首次注射FSH后48h、60H和72h,肌肉注射氯前列烯醇0.2mg。据观察,奶牛在首次使用氯前列烯醇后30-60小时处于发情期(在某些情况下,在第二天)性周期第16天肌肉注射妊娠马血清2500iu,第20~21天静脉注射人绒毛膜促性腺激素2000iu;在某些情况下,在性周期的第8-14天肌肉注射2000 IU的怀孕马血清,然后在48小时后肌肉注射33 mg前列腺素f2a33(超排次数与激素剂量有关)。如果剂量过大,很容易损害卵巢功能。一般以每次排卵10头左右为宜;当排卵数为1121时,奶牛超排后的受精率、恢复率和受孕率下降
n治疗应仔细观察,每天2-3次。由于牛群中相互爬行的奶牛较多,为了保证准确度,可以用开瓶器检查发情情况。当宫颈完全打开,有适量的粘液流出时,即为发情。母牛人工授精的时间是在牛接受其他牛时计算的(关于超排母牛人工授精的时间和频率有不同的报道)。有的在发情后12小时或24小时受孕,有的在用氯前列烯醇治疗后48小时受孕。至于授精次数,有一次授精和三次授精(8h、16h、24h)。一般认为提高人工授精次数可提高超排奶牛的受精率
(2)胚胎采集
又称“卵子采集”。胚胎采集时间一般在发情后3-7天。胚胎采集有两种方法:手术和非手术。其中,非手术采集方法得到了广泛的应用。采用德国双向管采集胚胎(
操作方法:保定奶牛站。局部麻醉或用小剂量全身麻醉剂镇静。取出直肠内积聚的粪便。用0.1%新洁尔灭彻底清洗奶牛后躯,再用75%酒精擦拭外阴。在tw中插入了一个不锈钢芯o形管,使其笔直。直管插入阴道到达阴道穹窿,另一只手辅助直肠。慢慢将导管插入子宫体,插入子宫角约5cm,拔出管芯约2cm,然后使管沿子宫角弯曲方向进入子宫角深部。在这个过程中,助手抽出约2cm的内芯,操作者将管子放入子宫内至相应长度,直至管子送至子宫角的适当位置。其中一根管子叫做“气路”,用来给气球充气;另一种方式是“水路”。即注入并恢复fl把液体注入子宫。充气的气球可以将子宫角固定在子宫角的大弯曲处。此时,将试管内的不锈钢内芯全部取出,用50ml注射器经试管向子宫角内注入20-30ml冲卵液,然后将冲卵液吸入注射器。卵母细胞冲洗液从20ml增加到50ml,每个子宫角共用500ml。将回收的卵母细胞冲洗液轻轻注入500ml集卵杯中,静置30min,慢慢吸走上层液体。剩余30ml卵母细胞冲洗液置于数个直径为10cm的平板中,检查一个一个在显微镜下。将已检测的胚胎移入收集培养基
(3)胚胎保存
洗卵液和胚胎培养基是常见的。含有灭活小牛血清的PBS更为合适。成份:氯化钠8g,氯化钾2G,磷酸氢二钠1.15g,磷酸二氢钾0.2G,氯化钙0.1g,氯化镁0.1g,丙酮酸钠32mg,葡萄糖1g,牛血清白蛋白4G,卡那霉素25mg,酚红5mg,三重蒸馏水1000ml。小牛血清储存在20%,ph7.2和-20℃( (移植技术有两种:手术方法和非手术方法外径。目前,非手术移植被广泛应用。通过形态学观察和体外培养来评价冲洗后胚胎的质量,进而判断是否为可移植胚胎
,在放大80倍的固体显微镜下进行形态学观察。可移植胚胎的标准是胚胎发育与采集日期一致;形态典型,透明带完整或轻度损伤;胚胎结构清晰或缺损轻微;从整个胚胎中伸出的细胞部分或深色部分不超过胚胎总体积的1/5。体外培养:胚胎颜色太深或太深在37℃培养出许多从整个胚胎中伸出的细胞℃ 如果它们发育成可移植胚胎的话。将PBS培养的胚胎按直肠颈人工授精法
注入子宫深角
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