牛结核病是由牛分枝杆菌引起的一种慢性人畜共患病。近年来，人类结核病的阳性检出率逐年上升。1993年4月，世卫组织宣布了“全球结核病紧急情况”。1998年，它重申“遏制结核病的行动十分紧迫”，并将于3月24日定为“世界结核病日”。根据该报告，约10.6%的结核病由牛分枝杆菌引起，7%的牛结核病由人类结核分枝杆菌引起。世卫组织还指出，在那些仍然存在牛结核病的国家，人类总是受到牛结核病的威胁，除非人类结核病得到根除，否则h人类结核病不会成功。因此，牛结核病是人类结核病控制成功的重要因素。让我们进一步了解结核分枝杆菌γ-干扰素治疗牛结核病的优势(流行特征牛分枝杆菌可以感染不同种类的温血动物，甚至一些家禽。其中，牛是牲畜中最易感病的，尤其是奶牛。该病主要通过呼吸道和消化道传播，也可通过交配传播。结核病牛会从痰、奶和粪便中呼出结核分枝杆菌，污染环境。康达吸入被感染的飞沫是牛结核病的主要感染途径，少量的牛分枝杆菌可引起感染。食用感染性粘液、粪便、尿液甚至牛奶都会引起感染。人类主要由牛结核分枝杆菌或结核分枝杆菌感染引起。感染的主要途径是食用未经检疫的动物产品，特别是饮用未经巴氏杀菌或煮沸的结核牛的牛奶，这是通过消化道感染的。小牛感染牛结核分枝杆菌最多。此外，经常接触结核病牛可通过呼吸道感染引起结核病。牛结核病不仅古老，而且广泛在世界各地都有分布。美国是世界上第一个消灭牛结核病的国家。美国于1957年宣布牛为“无肺结核”牛，但由于其他动物感染肺结核，特别是野生动物和观赏动物和肺结核，有可能感染牛，因此美国牛仍处于检疫和高度戒备状态。在广大的第三世界国家，感染率仍然很严重，从5%到10%不等，高达20%，严重影响人类健康和养牛业的发展（

近年来，我国奶牛养殖规模不断扩大，养牛数量不断增加g迅速增加，饲养方式多样化，牛结核病风险增加。控制和根除牛结核病已成为主要目标之一。控制牛结核病传播的主要措施是对牛进行检疫和净化，及时发现和杀死患病牛，最终建立非结核病牛。中国国务院发布了《关于促进奶牛持续健康发展的意见》。它强调了改进重大流行病预防和控制以及杀死患有结核病的奶牛的政策。因此，牛结核病的最终纯化必须依靠一种快速、灵敏、特异的d诊断方法(检测方法牛结核病的检测方法主要包括细菌学检测、免疫学检测和分子生物学诊断。传统的细菌学检测方法主要有抗酸染色和细菌分离培养，但抗酸染色后的显微镜检测灵敏度很低，不合格样品的阳性率较低，很容易误诊，且不能区分耐药结核分枝杆菌；由于结核分枝杆菌生长缓慢，分离率低，屠宰取样少，不适合活动物检疫。免疫试验主要包括结核菌素皮内试验结核菌素对比试验、血清学诊断和IFN-γ试验。目前，WHO推荐的牛结核病检测和诊断方法仍然是结核菌素（PPD）过敏试验。由于迟发性过敏反应的滞后性，该方法在一段时间（30天）内不能重复。产生结果需要很长时间。操作繁琐，对奶牛刺激性大，容易造成产奶量下降。此外，由于纯化结核菌素皮试的个体差异较大，注射剂量和结核菌素批号对牛个体有不同的反应，表现出不同的皮肤反应。结果取决于皮肤厚度的增加这很容易导致人为错误。IFN-γ试验是一种快速检测牛结核病的方法，即在体外使用禽和牛PPD刺激牛血液，并检测牛血液中释放的IFN-γ。结果表明，box检测的主观性和特异性明显增强，box检测结果的客观性和可靠性明显提高。1991年，澳大利亚卫生委员会将该方法确定为检测牛结核病的正式方法。由于全血IFN-γ水平对结核分枝杆菌感染的检测具有高度的敏感性和特异性，为结核病的早期诊断提供了一种新的方法。A.目前，国际兽疫局已将γ-干扰素试验列为国际贸易结核病检测的替代方法，由商业化试剂盒提供，并批准用于欧盟、美国、新西兰、澳大利亚和其他国家的结核病控制计划(试验原理

牛分枝杆菌皮内结核菌素试验的原理是，当人体受到结核分枝杆菌的刺激时，T淋巴细胞转变为淋巴母细胞，然后增殖并分化为致敏淋巴细胞，使机体致敏。例如，当再次接触结核分枝杆菌时，致敏淋巴细胞释放各种淋巴因子，产生迟发性过敏反应，which的特征是单核细胞浸润和组织坏死，由巨噬细胞释放的深层酶体酶和淋巴细胞释放的淋巴毒素引起。健康动物皮内注射纯化结核菌素未显示明显的局部炎症反应。如果注射到感染结核病的动物体内，会发生迟发性超敏反应。注射后，局部会出现红斑、水肿、肿胀和硬炎症。注射27～72小时后反应最强，然后逐渐消退（

IFN，与皮内变态反应-γ相比，使用两种单克隆抗体的夹心ELISA提高了试验的特异性，克服了这一缺陷结核菌素皮内过敏易出现假阳性；皮内变态试验一般需要72小时观察结果，费时费力。不过，这项测试只需要保定动物一次，省时省力；人体因素对皮内变态反应结果的测定有很大影响，检测采用商用试剂盒，易于实现标准化、科学化、客观化。IFN-γ本实验具有检测早期感染的能力。平行的两个实验可以检测到更多受感染的动物。基于上述优势，IFN-γ试验已在许多国家的结核病控制计划中用作一种育种试验，以增强特异性并通过平行试验提高敏感性

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结核菌素皮内过敏被国际兽疫局列为国际贸易指定检测方法，也是中国国家标准规定的检测方法。鉴于这种方法的局限性，单靠结核菌素试验不可能从人群中彻底根除结核病。IFN-γ试验是OIE指定的国际贸易替代试验。它可以作为筛查牛结核病的平行试验，最大限度地检测受感染的动物，并确认皮内过敏试验的结果，作为牛结核病的繁殖试验。这对今后的牛结节病检疫工作具有重要意义.

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牛结核病体外诊断试剂盒，仅用于兽医诊断实验室

1，简介

。牛结核病是一种由牛分枝杆菌感染引起的疾病，在世界许多国家都有发生，在乳品工业中占有非常重要的地位。在一些国家，一些奶牛的总发病率接近60-70%(BOVIGAM TM原则上是一种牛结核病快速诊断试剂盒，基于血液T淋巴细胞对牛分枝杆菌PPD的细胞免疫反应(将结核菌素PPD抗原呈递于全血组织培养的淋巴细胞后，感染牛分枝杆菌的细胞可产生IFN-γ，I用单克隆抗体夹心ELISA法检测t。未感染牛分枝杆菌的淋巴细胞不产生IFN-γ，因此，γ-干扰素的检测与结核分枝杆菌感染有关（

。牛结核菌素皮肤试验后使用bovigamtm。在皮肤试验检测到阴阳结果后3-30天可用γ-干扰素试验（

三，现场研究

在澳大利亚、美国、爱尔兰、新西兰、意大利和西班牙的13000头奶牛中进行了现场试验。结果表明，BOVIGAMTM对检测牛结核病更为敏感，甚至可以检测牛的早期感染

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在现场对20头对灭活结核分枝杆菌敏感的赫里福德食用牛进行了试验美国农业部库存细菌疾病研究中心/ARS/国家动物疾病中心（美国爱荷华州艾姆斯）实验室对照研究。比较bovigam TM对美国PPD和辉瑞澳大利亚PPD的反应。结果表明，无论是美国PPD还是澳大利亚PPD刺激，所有牛都呈阳性。此外，新西兰的研究表明，试剂盒的特异性不受皮试的影响。当在尾根褶试验（CFT）后3-30天使用时，试剂盒比颈部皮肤试验（CCT）更敏感

IV。试剂盒成分

试剂盒储存在2-8℃下。除酶标记的结合物外，所有试剂在使用前均恢复至室温（22°±5°C）。把它放回2-8摄氏度使用后立即

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