
不同稀释液对种蛋受精率的影响
随着现代养鸡业的发展,种鸡普遍采用笼养,这使得鸡的人工授精技术得到进一步推广。由于鸡多,射精少,公鸡精子密度高,稀释后的精液能使精子在溶液中均匀分布,稀释精浆中的有害物质,防止细菌滋生,提高精子活力,增加每只母鸡的精液量,提高鸡蛋的受精率,从而提高经济效益。本试验旨在验证三种不同稀释液和0.9%NaCl的不同稀释倍数对种蛋受精率的影响,以期达到提高种蛋受精率的目的为人工授精技术在我国的广泛应用提供一定的参考(
1.材料与方法
1.1实验药物与仪器
1.1.1药物0.9%NaCl,5%葡萄糖溶液,谷氨酸钠(
1.12器械干燥箱,容量瓶,精子收集杯,输精管、滴管、保温杯、医用棉和精子收集管(
1.2实验方法
1.2.1时间和地点
实验时间为2009年2月15日至2009年3月20日,实验地点选在秦皇岛市昌黎县海兰褐种养殖场,试验在该养殖场进行(
1.2.2公鸡的选择
本试验共选择公鸡30只. 选用冠大鲜红色、饱满挺拔、发育良好、体重适中、选择性发射好、乳头饱满。公鸡采用单笼饲养,全家养统一配方饲料,自由喂养,并提供足够的饮用水(
1.2.3种公鸡
训练试验前2周,对种公鸡进行按摩采精训练,采精前3~4小时停止喂养。受精人员和精子采集时间应固定。在手术中,公鸡泄殖腔周围的羽毛被切断,以免妨碍精子的收集。在训练期间,可以连续采集精液3天,休息1天。船尾er多次定期按摩,可达到理想的采精效果。在训练期间,检查精液质量,测定精子活力和精子密度。对未达到理想效果的公鸡进行淘汰(
1.2.4母鸡的选择和分组随机抽取400只母鸡进行笼养。为了消除人为因素的影响,试验前对蛋鸡的产蛋性能和产蛋率进行了测定。母鸡分为8组。200例按不同稀释液随机分为4组,每组50例。取原精液作为对照组,其余精液作为实验组,0.9%NaCl稀释液作为实验组1e其余200只母鸡按不同稀释倍数平均分为4组:
1.2.5稀释液,
0.9nacl和5%葡萄糖(北京恒业中原化工有限公司生产);2.4%谷氨酸钠溶液:将2.4G分析纯谷氨酸钠溶于蒸馏水中至100ml(
1.2.6授精授精
用洗涤剂清洗授精授精器具,用蒸馏水冲洗,用脱脂棉包好,高温灭菌,在干燥箱中干燥备用。采精时间定在下午4点左右,通过腹部和背部按摩采精。将采集到的精液进行混合并分组及时。按1-5的比例用不同的稀释剂进行等温稀释,试验4组按1.2.4的比例进行稀释。授精时,助手抓住鸡腿,用另一只手轻轻按压鸡腹部,使泄殖腔外翻。然后将吸入稀释精液的标准剂量滴管插入泄殖腔左侧2cm处注射精液(
1.2.7采卵
从授精后第5天开始采集卵子并做好标记。每组采集的卵在同一箱中孵化,孵化后5-6天测定受精率。卵子每周孵化一次,受精率为100%结果经t检验,第三组受精率显著高于对照组和第一组(P<0.01)。两组受精率差异有显著性意义(P>0.05)。第1组受精率显著高于第2组(P<0.05)。结果表明,以2.4%谷氨酸钠的受精率最高,其次为0.9%氯化钠和5%葡萄糖。两组受精率无显著性差异(P>0.05)。用
0.9%NaCl稀释的卵子受精率显著高于对照组(P<0.05)
3.分析与讨论
3.1原精液受精率分析
根据报道的数据和本试验,受精后原精液受精率较低。主要原因是原精液粘稠,精子代谢能力强,能量消耗快。如果保存时间长,由于乳酸的积累,很容易改变精子的生存环境,导致精子失去活力,畸形死亡,导致精子丧失受精能力(
分析用3.22.4%谷氨酸钠
饲育鸡蛋的受精率与猪、牛等家畜相比,谷氨酸钠的含量在猪、牛、猪、猪、牛、猪、猪、猪、牛、猪、牛、猪、猪、牛、猪、猪、牛、猪、牛、猪、牛、猪、牛、猪、牛、猪n鸡精液含量较高。实验表明,从蛋鸡输卵管中提取的谷氨酸能延长鸡离体精子的寿命,说明谷氨酸对鸡精子有保护作用[1]。本实验以谷氨酸钠作为精液稀释液,卵子受精率较高,充分说明谷氨酸钠对鸡精子有很大的保护作用(
0.9%NaCl能降低精液和缓冲液的浓度,提高精子活力,改善输精管环境,促进精子运动。0.9%NaCl能刺激输卵管蠕动和输卵管上皮细胞的纤毛运动,使精子易于充满整个输卵管提高施肥率。一般不能供给精子营养,所以用0.9%氯化钠稀释精液后及时授精。5%葡萄糖稀释液除了具有稀释作用外,还能为精子存活提供外部能量。在本实验中,收集到的精液经稀释后立即受精而不保存,因此提供维持渗透压平衡的物质比提供能量更为有利。另外0.9%NaCl稀释液与5%葡萄糖稀释液粘度不同,稀释后母鸡精子在体内运行的速度也不同,因此到达受精部位的精子数量和精子活力也不同,这是造成结果差异的主要原因. 由于氯化钠和葡萄糖的性质不同,它们对精子的影响也不同。据报道,0.9%NaCl溶液的pH值接近7.0,而5%葡萄糖溶液的pH值只有6.5左右。因此,pH值对精子活力和精液保存的影响也是影响受精率的因素之一(对3.40.9%NaCl
不同稀释率的分析本实验采用高稀释率的方法提高精液的受精率,使每只母鸡的精子数保持一致,而不受稀释率的影响。结果表明,两组受精率无显著差异(P>0.05)。因为稀释0.9%NaCl的配比不足以使精子充分稀释,稀释液中精子的代谢能力不降低,能量消耗迅速,导致精子活力减弱。0.9%NaCl稀释卵子的受精率与对照组相比有显著性差异(P<0.05),因为它能充分稀释上清,使精子分布更加均匀,处于最大活性状态。在不改变每只母鸡精子输入总量的情况下,获得了较好的受精率。一般情况下,产蛋初期母鸡适宜用0.05ml原精液,产蛋中期母鸡适宜用0.025ml
,产蛋中期母鸡适宜用0.05ml40周龄后的母鸡。由于本试验采用浅授精,在授精过程中容易造成精液回流,稀释率低,精液浓度高,回流损失的精子数较多,实际输入母鸡的有效精子数较少,受精率较低。鸡精液稀释后,中等稀释度不影响精子活力,但高稀释率(1-5)显著降低精子密度,影响鸡精子的生存环境。鸡精子过度稀释会产生“稀释效应”,其特点是刺激精子的活性和代谢,从而缩短精子的活动时间,提高存活率子叶离体培养时间。建议在浅表授精过程中采用1:2的稀释比(
4)。结论本试验比较了0.9%NaCl、5%葡萄糖和2.4%谷氨酸钠稀释液的受精率。三种稀释液中,以2.4%谷氨酸钠为最佳。不同稀释率的0.9%NaCl稀释液的卵子受精率最高,而1-1.5稀释液加2.4%谷氨酸钠和1-2稀释液加0.9%NaCl稀释液的卵子受精率差异不显著。虽然0.9%NaCl稀释液稀释精液后受精率较低,但0.9%NaCl不需要制备方便,来源广泛,价格低廉。如果授精时母鸡较多,建议短期授精时用0.9%NaCl作稀释剂,可有效降低种蛋成本。用2.4%的谷氨酸钠作稀释剂比较麻烦,但如果时间足够,不需要及时授精,建议用2.4%的谷氨酸钠作稀释剂,可以提高种蛋的受精率。
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