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鸡新城疫Ⅰ系弱毒疫苗的制造方法

2024年10月15日 编辑:养殖网 浏览: 244次

新城疫Ⅰ号减毒疫苗

的制造方法新城疫是一种由病毒引起的急性化脓性传染病,俗称“鸡瘟”,即所谓的亚洲鸡瘟。该病可全年发生,尤其是在寒冷多变的季节。所有年龄的鸡都可能被感染。20-60日龄的鸡最易感病,死亡率高(由于易感病,死亡率高,主要通过免疫预防。疫苗分为灭活疫苗和活疫苗。活疫苗主要有Ⅰ株、Ⅱ株(B1株)、Ⅲ株(f株)、Ⅳ株(LaSota株)、克隆-30等。Ⅰ株疫苗为中疫苗毒力。它对鸡有很强的毒力,能引起症状甚至死亡,但能迅速产生较强的免疫力。主要用于2月龄以上雏鸡或紧急接种

1株

新城疫病毒Ⅰ株由中国农业部兽药监督所提供。结果表明,鸡胚的最低致死量不低于10~/ml,接种后24~72h内死亡,胚体明显受损,红细胞凝集率大于1:80;病毒种子对鸡的最低免疫剂量不应低于10.6/ml;安全无菌

2I生产线v的生产方法将健康育种者(一般不超过7天)生产的新鲜鸡蛋,除去蛋壳外的污垢后,放入38.5-39.0。C.相对湿度为60%~70%的培养箱,培养9~10天,是生产鸡胚的来源。鸡胚接种前,应根据虫卵选择活力强的发育胚,并做好气室和接种部位的标记,病毒种子转移时不应选择活力弱的胚或死胚(

,病毒种子用无菌生理盐水按1:100稀释后接种于9~10日龄鸡胚尿囊腔,每次0.1ml胚胎。接种后,将接种在蛋壳上的鸡蛋融化石蜡密封,在培养箱中继续孵化。之后,每天早晚各取一次鸡蛋。胚胎应在接种后24-48小时内死亡(一般在36小时之前和之后)。死胚的气室应向上,并在0-10℃冷却℃ 持续4-24小时。24小时内和48小时后死亡的胚胎和卵子应全部丢弃(

取出冷却后的死胚胎,将气室向上,涂5%碘酊。使用灭菌钳将气室中的蛋壳打碎取出,取出蛋壳膜,取羊绒膜和羊膜e切取尿囊液和羊水,用无菌移液管吸取,放入灭菌瓶中。将多个胚胎的胚液混合成一组,立即加入青霉素和链霉素,各500U/ml。放入冰箱保存,检验后制成疫苗。收获疫苗时,要观察胚胎体的病变情况是否良好(胚胎全身充血,头、胸、背、翼、趾有小出血点)。注意胚液是否清澈。如果胎体无病变,胎儿腐烂,胎液混浊,应及时处理丢弃的。同时,将胚体与胚液一起收获并磨碎,制成全胚疫苗(

将收获的鸡胚液逐瓶进行无菌试验,即:,每瓶取疫苗0.2ml,分别接种于血坡和熟肉基地。72小时后37℃, 不应有细菌生长,然后将无菌生长的疫苗混合并分装进小瓶或安瓿中。每瓶0.5-1.0毫升。瓶或安瓿上应标明疫苗的名称、批号和收获日期(

3疫苗试验

每批疫苗制备完成后,必须进行以下三项试验使用前进行,合格者方可使用(

无菌试验:每批取5瓶疫苗作为样品,方法同上,应无细菌生长,做细菌培养,同时,还可注射小鼠若干只,每次皮下注射0.2ml,观察10天,不应该死。如果细菌生长或小鼠死亡,疫苗将被丢弃(

安全性试验:3只未接种新城疫疫苗的4-12月龄健康鸡肌肉注射稀释100倍的1ml疫苗。观察10-14天后,应无反应或轻度反应。如果患者在14天内康复,则视为合格。如果患者反应严重不能恢复,应重复一次(

效价试验:① 选取4~12月龄健康雏鸡,随机分为两组。一组为对照组。所有鸡不得感染新城疫或接种疫苗。如情况不明,应取鸡翅各静脉血分离血清进行血凝抑制试验。血凝抑制值低于1:20可用于试验,但血凝抑制值超过1:20时不能用于试验。② 实验组每只鸡肌肉注射1ml疫苗d我试了1000次。观察10~14d后,观察组采用与对照组相同的方法进行新城疫病毒攻击。每只鸡肌肉注射1000倍稀释的新鲜鸡胚毒液1ml。观察10~14d,试验组免疫鸡全部成活,对照组免疫鸡全部患病,至少2/3免疫鸡死亡。如果接种的鸡不能发病或全部接种的鸡都病了,且不到2/3的接种鸡死亡,则可重复一次试验。如果接种疫苗的鸡et患病或死亡,此批疫苗将被视为无效和废弃(

4疫苗的使用和保存

方法:① 这种疫苗是专门用于2个月以上的鸡,禁止用于新生鸡。② 用灭菌生理盐水或蒸馏水或冷开水(不允许用热水或温水)稀释100次,用灭菌笔尖蘸取稀释后的疫苗,刺入无血管鸡翅内侧皮下(各2次)。或皮下注射0.1ml,也可稀释1000倍,肌肉注射1ml。③ 稀释后的疫苗应冷藏,当天用完,第二天不行。④ A接种3-4天后,即可产生免疫力。成年鸡的免疫期为1年,2月龄鸡的免疫期为半年(

保存期:从鸡胚液收获之日起15天℃ 不得超过20天和15-25天℃ 不得超过14天;25-30 ℃ 不超过7天(

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